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超精准“CRISPR剪刀”来了

2020-02-13 中国科学报 唐一尘
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  CRISPR基因组编辑工具的超精确版本正变得愈发强大。近日,研究人员利用工程酶提高了基因编辑技术的准确性,在精确定位DNA的同时,又不会引入太多不必要的突变。

  发表在最新一期《自然—生物技术》上的这一成果,可以使碱基编辑的方法更加可行,进而成为治疗遗传疾病的更有效工具。

  “人类的基因组编辑时代现在正处于脆弱的开端,我们都有责任尽一切可能减少不利影响。”该研究负责人、美国博德研究所化学生物学家David Liu说。

  在CRISPR-Cas9编辑中,研究人员使用Cas9酶切断DNA双链,然后依靠细胞的DNA修复机制在该位置引入DNA序列的改变。这种方法虽然有效,但对于引入什么序列几乎无法控制。然而,在碱基编辑中,Cas9酶切割DNA的能力被破坏了,并与其他酶融合在一起,这些酶可以用化学方法将DNA的一个“字母”转换成另一个。Cas9将这些酶引导到目标位置。在那里,它们不是破坏DNA的两条链,而是重写一个特定的“字母”。

  但是,这项技术仍然需要优化。为此,该研究组开发了几种方法,寻找细菌和人类细胞中的脱靶突变,而不需要对整个基因组进行测序。在其中一种方法中,研究人员将碱基编辑器插入细菌中,并测试了微生物的抗生素耐药性。细菌细胞的耐药频率越高,碱基编辑器在其中的DNA突变就越活跃。

  研究小组筛选了各种酶,包括自然产生和人工合成的酶,以寻找保真度更高的碱基编辑酶。结果他们发现了一组酶,可以将C转化为T,而不会引起许多脱靶突变。

  皇冠最新新2官网遗传与发育生物学研究所植物生物学家高彩霞表示,减少脱靶对将碱基编辑用于疾病治疗十分重要。她表示,筛选方法比新酶本身更令人兴奋。因为一些碱基编辑器在植物细胞中不能很好地工作,所以她希望能筛选出有效的工具。

打印 责任编辑:侯茜
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